紫外光照射检测大肠杆菌基因突变的方法探析
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2025-07-07 21:00:43
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要检测大肠杆菌在紫外光照射下某个基因是否发生了突变,通常会采用分子生物学的方法。下面是一种常用的方法:

1. DNA 提取

  • 首先从处理过的(即经过紫外光照射的)和未经处理的大肠杆菌中提取基因组 DNA。

2. PCR 扩增

  • 使用特异性的引物对目标基因区域进行 PCR 扩增。这些引物应该覆盖你感兴趣的基因区域,这样可以确保扩增出来的片段包含你想要检查的突变位点。

3. 凝胶电泳

  • 对 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳,以确认 PCR 反应成功并获得纯度较高的扩增产物。

4. 测序

  • 将 PCR 产物送去做测序。通过与未照射的大肠杆菌中的基因序列进行比较,可以发现任何可能的碱基变化或插入/缺失突变。

5. 生物信息学分析

  • 使用生物信息学工具比对测序结果与参考基因序列,以确定是否存在突变以及突变的具体类型和位置。

6. 其他可选方法

  • 限制性片段长度多态性 (RFLP):通过特定的限制性内切酶消化 PCR 产物,并使用凝胶电泳来检测片段长度的变化。如果突变导致了酶切位点的丢失或增加,则 RFLP 图谱会发生改变。
  • 单链构象多态性 (SSCP)变性梯度凝胶电泳 (DGGE):这些技术也可以用来检测突变,但它们通常需要更复杂的实验步骤和设备。

总结:

最准确且详细的方法是通过测序来检测突变。测序不仅可以检测到单个碱基的改变,还能提供突变的具体位置和类型,从而全面了解基因突变的情况。


为了检测大肠杆菌在紫外光照射下,某基因是否发生了突变,下列哪种方法正确?

A.利用限制酶EcoRⅠ对特定序列的识别来检测

B.利用特异性抗体对该基因表达产物进行检测

C.利用DNA.水解酶作用的专一性来进行检测

D.利用相应的DNA.探针进行分子杂交来检测

D

解析

试题分析:限制酶的作用是识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点进行切割,对于识别序列之间的碱基没有检测作用,故A.错误;特异性的抗体只能检测特定的蛋白质,且密码子具有简并性,发生基因突变不一定会导致蛋白质变化,故B错误;DNA.水解酶只能水解DNA.分子,不具有检测作用,故C错误;DNA.探针的原理是DNA.分子杂交,通过是否形成杂交带来进行检测,故D正确。

考点:本题考查基因工程、基因控制蛋白质合成等相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力;能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论。

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