（来源：抗体圈）

近年来，信使核糖核酸（mRNA）技术凭借其高效的基因表达调控能力与灵活的可设计性，为肿瘤免疫治疗领域注入新动能；而嵌合抗原受体T细胞（CAR - T）疗法作为细胞治疗的里程碑，虽在血液肿瘤中展现显著疗效，却面临个体化制备周期长、脱靶毒性及实体瘤穿透不足等挑战。二者的协同应用通过mRNA介导的CAR瞬时表达、功能模块动态调控及多靶点共表达等创新策略，有望突破传统CAR - T的局限性，为提升治疗安全性、拓展适应症范围提供新范式。

本文系统综述mRNA技术与CAR-T疗法协同应用的作用机制、靶向递送这一关键技术的突破及临床转化前景，旨在为该交叉领域的深入研究提供理论参考。

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研究背景

嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法作为肿瘤免疫治疗的里程碑式突破，在血液系统恶性肿瘤（如急性淋巴细胞白血病、弥漫大B细胞淋巴瘤）中展现出显著疗效，部分患者甚至达到长期缓解。然而，其在实体瘤治疗中的局限性（如肿瘤微环境抑制、抗原逃逸、脱靶毒性）、个体化制备周期长（需体外扩增T细胞）以及潜在的长期安全性风险（如插入突变），成为制约其广泛应用的关键瓶颈。

与此同时，信使RNA（mRNA）技术凭借其快速设计、瞬时表达、无需基因组整合等独特优势，近年来在疫苗、蛋白替代治疗等领域取得突破性进展。将mRNA技术与CAR-T疗法结合，通过优化CAR表达模式、调控T细胞功能或重构肿瘤微环境，为解决上述挑战提供了创新思路。本文将系统梳理mRNA技术与CAR-T疗法协同应用的核心策略、研究进展及未来前景。

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核心内容详解

一、mRNA技术与CAR-T疗法的基础概述

1.1 CAR-T疗法的原理与局限性

CAR-T疗法通过基因工程技术将识别肿瘤抗原的单链抗体（scFv）与T细胞激活结构域（如CD3ζ）及共刺激结构域（如CD28、4-1BB）融合，构建嵌合抗原受体（CAR），再将其转导至患者自体T细胞中，使T细胞获得特异性识别并杀伤肿瘤细胞的能力。目前，基于慢病毒或逆转录病毒的整合型CAR-T已获批用于多种血液肿瘤治疗，但存在以下关键问题：

•实体瘤疗效不足：肿瘤微环境中的抑制性细胞（如Treg、M2型巨噬细胞）、免疫抑制因子（如TGF-β、IL-10）及物理屏障（如纤维化基质）显著削弱T细胞浸润与活化；

•抗原逃逸：单一靶点（如CD19）的CAR-T易因肿瘤抗原下调或丢失导致复发；

•制备周期长：自体T细胞的采集、转导、扩增需2-4周，部分急重症患者无法及时接受治疗；

•长期安全性风险：病毒载体整合可能激活致癌基因，导致插入突变；持续的CAR表达可能引发不可逆的细胞因子风暴（CRS）或神经毒性（ICANS）。

1.2 mRNA技术的特性与优势

mRNA是一类携带遗传信息的单链核酸分子，通过胞内翻译直接表达目标蛋白。与传统基因编辑技术（如病毒载体、DNA质粒）相比，mRNA技术具有以下独特优势：

•瞬时表达：mRNA在胞内仅存在数天至数周，可避免长期蛋白表达引发的毒性；

•无基因组整合风险：无需插入宿主基因组，降低致癌风险；

•快速设计与生产：基于序列合成的mRNA可在数天内完成设计，适合个性化治疗；

•功能多样性：除编码CAR外，还可同时表达共刺激分子、细胞因子或免疫检查点抑制剂，实现多靶点调控。

二、mRNA体内CAR-T疗法的优势与技术创新

2.1 mRNA编码CAR的瞬时表达：精准控制T细胞活性

传统CAR-T的整合型表达模式导致CAR持续存在，可能引发过度活化的毒性反应（如CRS）。而通过电转或脂质纳米颗粒（LNP）递送mRNA至T细胞，可实现CAR的瞬时表达（通常持续5-14天），为控制T细胞活性提供新途径。例如，研究显示，mRNA-CAR-T在靶向CD19的B细胞淋巴瘤模型中，既能有效清除肿瘤细胞，又能减少因长期CAR表达导致的T细胞耗竭和脱靶效应。此外，瞬时表达模式可降低对肿瘤微环境中抑制信号的敏感性，尤其适用于实体瘤治疗——当T细胞浸润至肿瘤组织后，短暂的CAR表达足以触发杀伤，随后T细胞恢复“静息”状态，减少被微环境抑制的风险。

2.2 多靶点mRNA CAR设计：克服抗原逃逸

肿瘤细胞常通过下调或丢失单一抗原（如CD19）逃避免疫攻击。利用mRNA的多顺反子特性，可设计同时编码2-3种不同靶点（如CD19 + BCMA、HER2 + EGFRvIII）的CAR，使T细胞识别多个肿瘤相关抗原（TAA），显著降低逃逸概率。例如，一项针对多发性骨髓瘤的临床前研究中，双靶点mRNA-CAR-T（靶向BCMA和CD38）对单一抗原阴性的肿瘤细胞仍保持杀伤活性，疗效优于单靶点CAR-T。此外，mRNA的灵活设计还可实现“逻辑门”调控——如仅当两个靶点同时存在时激活CAR，进一步提高特异性。

2.3 mRNA递送共刺激分子/细胞因子：增强T细胞功能

T细胞的活化需双信号刺激（抗原识别信号 + 共刺激信号）。肿瘤微环境中，共刺激分子（如CD80/CD86）的缺失或抑制性分子（如PD-L1）的高表达会导致T细胞失活。通过mRNA递送4-1BBL（CD137L）、OX40L等共刺激配体，可在T细胞表面或肿瘤局部持续表达，强化共刺激信号；同时，编码IL-12、IL-15等细胞因子的mRNA可改善T细胞增殖、存活及代谢状态，延长其在体内的持久性。例如，在胰腺癌模型中，表达IL-12的mRNA-CAR-T显著提高了T细胞浸润能力，并通过激活M1型巨噬细胞重塑肿瘤微环境，抑瘤效果较传统CAR-T提升3倍以上。

2.4 靶向递送助力实现体内原位CAR-T生成

传统CAR-T需体外分离、转导、扩增T细胞，耗时且成本高昂。利用靶向T细胞的LNP递送mRNA-CAR，可直接在体内转染循环中的T细胞，实现“原位CAR-T”生成。

例如，通过修饰LNP表面的靶向肽（如抗CD3抗体），使其特异性结合T细胞并递送mRNA-CAR，无需体外操作。动物实验显示，这种“体内CAR-T”在白血病模型中可快速激活内源性T细胞，疗效与传统CAR-T相当，但制备周期从数周缩短至数天，为急重症患者提供了更及时的治疗选择。

其他靶向性聚合物、天然递送材料也在开发阶段。

三、研究进展与临床转化

目前，肿瘤领域（血液肿瘤和实体瘤）仍是mRNA-CAR 疗法的主战场，其中血液肿瘤包括CD33、CD117、BCMA 等靶点，实体瘤有TROP2等靶点。尽管mRNA CAR-T疗法中进展最快的项目Descartes-08，递送方式仍是电穿孔（非体内CAR-T疗法）为主，但随着抗体偶联LNP等新型靶向递送系统的技术不断突破，mRNA体内CAR-T疗法已进入快速发展阶段。

同样，基于靶向递送技术的开发与完善，mRNA体内CAR-T疗法的有效性在非肿瘤领域也得到了初步验证，如FAP-CAR mRNA治疗心肌损伤、uPAR-CAR circRNA改善细胞衰老等。

此外，CAR-M疗法也随之发展，例如MRSA靶向SasA-CAR mRNA治疗败血症的效果得到了验证。

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小结

mRNA技术与CAR-T疗法的协同应用，通过精准控制CAR表达、增强T细胞功能及简化制备流程，为解决传统CAR-T的局限性提供了创新路径。随着mRNA递送系统的优化，实现了CAR mRNA的体内靶向递送，有望推动免疫治疗进入“精准可控”的新阶段，为更多患者带来生存获益。

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参考文献

[1] J Transl Med. 2025 Dec 9. doi: 10.1186/s12967-025-07470-7              

[2] Nat Rev Drug Discov. 2025 Sep 30. doi: 10.1038/s41573-025-01291-5

[3] Front Immunol. 2025 Oct 22;16:1680071.