PCR技术扩增目的基因的关键步骤与试剂加入详解
创始人
2025-07-06 18:01:11
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在利用PCR(聚合酶链式反应)技术扩增目的基因的过程中,需要加入以下几种主要成分:

  1. 模板DNA:这是含有你想要扩增的目的基因的DNA片段。PCR反应中,模板DNA被用于合成新的DNA链。

  2. 引物:引物是短的单链DNA片段,它们与模板DNA上的目标区域互补配对。引物引导DNA聚合酶从特定位置开始合成新的DNA链。通常情况下,每条链需要一条引物,所以扩增一个基因需要两段引物,一段与正链互补,另一段与负链互补。

  3. DNA聚合酶:这是一种特殊的酶,负责在引物的引导下合成新的DNA链。最常用的DNA聚合酶是从水生栖热菌(Thermus aquaticus)中提取的Taq DNA聚合酶,因为它能在高温条件下保持活性。

  4. dNTPs(脱氧核糖核苷三磷酸):包括dATP(腺嘌呤脱氧核糖核苷三磷酸)、dCTP(胞嘧啶脱氧核糖核苷三磷酸)、dGTP(鸟嘌呤脱氧核糖核苷三磷酸)和dTTP(胸腺嘧啶脱氧核糖核苷三磷酸)。这些是DNA合成的基本原料。

  5. 缓冲液:提供适宜的pH环境和离子浓度,以维持酶的最佳活性,并保证PCR过程中的化学反应顺利进行。

这些成分共同作用,在PCR仪设定的循环条件下,完成DNA的扩增过程。


利用PCR技术扩增目的基因的过程中,需加入(  )

A 耐高温的解旋酶以保证DNA双链完全解开

B 2种已知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸

C 4种足量的核糖核苷酸以保证目的基因的扩增

D 一定量的盐酸和氢氧化钠溶液以维持pH的稳定

B

解析

解:A、PCR技术中,采用高温使DNA解旋,并没有使用解旋酶,故A错误;

B、利用PCR技术扩增DNA的过程中,需要2种已知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸,故B正确;

C、PCR技术的原理是DNA复制,需要4中足量的脱氧核糖核苷酸作为原料,故C错误;

D、利用PCR技术扩增DNA的过程中,需要一定量的缓冲溶液以维持pH的稳定,因为PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,故D错误.

故选B.

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